PCR實驗室平面布局要點分析

PCR技術憑借特異性強、靈敏度高、對檢測樣品要求低、方便快捷等優(yōu)點，廣泛應用于各種臨床診斷。PCR實驗室是承載PCR技術應用的設施，實驗室的合理設計才能確保檢測結果的可靠性，博泰小編帶大家了解PCR實驗室平面布局相關知識。

一、PCR實驗室平面布局要求

1、如果采用實時熒光PCR法，則擴增區(qū)和分析區(qū)可以合并為一個區(qū)。

2、如果樣本在擴增之前需要粉碎處理，則需要增加一個區(qū)域用于樣品的粉碎。

3、PCR實驗室一般由試劑儲備區(qū)、標本制備區(qū)、擴增區(qū)、擴增分析區(qū)4個區(qū)域組成。

4、如果采用全自動化PCR分析儀，則標本制備區(qū)、擴增區(qū)和分析區(qū)可以合并為一個區(qū)。

二、實驗室功能與設備設計要點分析

1、試劑儲備區(qū)

該區(qū)域主要完成試劑和主反應混合液的儲存、配制和封裝工作。所有運送到該區(qū)域的試劑和材料不應經(jīng)過其他區(qū)域，試劑和原材料應在本區(qū)內(nèi)儲存和制備。本區(qū)域的氣壓應相對外界保持正壓。該區(qū)域的設備主要是冰箱、天平、混勻器、低速離心機、加樣器、可移動紫外燈等。

2、標本制備區(qū)

該區(qū)域的功能是樣本的保存、核酸提取和貯存、樣本加入擴增反應管和測定DNA的合成。樣本應直接運送至該區(qū)并儲存在本區(qū)內(nèi)，不得經(jīng)過其他區(qū)域。對于氣流壓力的控制，由于在本區(qū)內(nèi)加樣操作可能產(chǎn)生氣溶膠，為避免氣溶膠擴散出去對外界造成污染，本區(qū)應對外界保持負壓;同時本區(qū)相對于擴增反應混合物配制和擴增區(qū)以及擴增產(chǎn)物分析區(qū)為正壓，以避免從鄰近區(qū)進入本區(qū)的氣溶膠污染。

3、擴增區(qū)

該區(qū)域的功能是DNA擴增和擴增片段的測定。此外，反應混合液制備成反應混合液和已制備的DNA模板的加入等也可在本區(qū)內(nèi)進行。對于氣流壓力的控制，相對于鄰近區(qū)域為負壓，以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。為避免氣溶膠所致的污染，應盡量減少在本區(qū)內(nèi)不必要的走動。個別操作如加樣等應在超凈臺內(nèi)進行。

4、分析區(qū)

該區(qū)域的功能是擴增產(chǎn)物的分析。該區(qū)域可能會用到某些可致基因突變的有毒物質(zhì)，應特別注意實驗人員的安全防護。對于氣流壓力的控制，該區(qū)域是PCR實驗的最后一步，相對于鄰近區(qū)域為負壓，以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。為避免氣溶膠所致的污染，應盡量減少在本區(qū)內(nèi)的不必要的走動。